PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗(yàn),通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程,若實(shí)驗(yàn)工藝需要,還應(yīng)增加樣品粉碎過程。
一、 分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室
所謂分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室,是指完成上述實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房彼此相距較遠(yuǎn),呈分散布置形式。對(duì)于這種布置形式的PCR實(shí)驗(yàn)室,由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)之間不易相互干擾,因此無需特殊條件要求。
二、 組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室
所謂組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室, 是指完成PCR四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房相鄰布置,組成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)域的形式。對(duì)于組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室,由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)間集中布置,容易造成相互干擾,因此,對(duì)總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間,以減少室內(nèi)外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入,造成污染;核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓,以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品。 如果使用熒光PCR儀,擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。
若房間進(jìn)深允許,可設(shè)PCR內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面,緩沖間比專用走廊更有意義。
PCR實(shí)驗(yàn)區(qū)的設(shè)置,幾個(gè)要注意的問題:
1、幾個(gè)區(qū)域的大小設(shè)置情況,應(yīng)該是試劑準(zhǔn)備區(qū)、產(chǎn)物擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū),要小一些。標(biāo)本制備區(qū)應(yīng)大一些。因?yàn)?,?biāo)本制備室要放置一個(gè)生物安全柜為一個(gè)低溫冰箱。
2、試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)就設(shè)立緊急洗眼器,以備不時(shí)之需。
3、PCR實(shí)驗(yàn)室的潔凈度可以根據(jù)用戶的實(shí)際使用情況和資金的投入來設(shè)計(jì)。
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